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固相萃取原理及操作步驟

更新日期: 2015-12-01
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固相萃取主要通過目標物與吸附劑之間的以下作用力來保留/吸附的1)疏水作用力:如C18、C8、Silica、苯基柱等2)離子交換作用:SAX,SCX,COOH、NH2等3)物理吸附:Florsil、Alumina等

  pH值對固相萃取的影響

  pH值可以改變目標物/吸附劑的離子化或質子化程度。對于強陽/陰離子交換柱來講,因為吸附劑本身是*離子化的狀態(tài),目標物必須*離子化才可以保證其被吸附劑*吸附保留。而目標物的離子化程度則與pH值有關。如對于弱堿性化合物來講,其pH值必須小于其pKa值兩個單位才可以保證目標物*離子化,而對于弱酸性化合物,其pH值必須大于其pKa值兩個單位才能保證其*離子化。對于弱陰/陽離子交換柱來講,必須要保證吸附劑*離子化才保證目標物的*吸附,而溶液的pH值必須滿足一定的條件才能保證其*離子化。

  固相萃取操作步驟及注意事項

  針對填料保留機理的不同(填料保留目標化合物或保留雜質),操作稍有不同。

  1)填料保留目標化合物

  固相萃取操作一般有四步:

  活化----除去小柱內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。(注意整個過程不要使小柱干涸)

  上樣----將樣品用一定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分保留在柱上。(注意流速不要過快,以1ml/min為宜,大不超過5ml/min)

  淋洗----大程度除去干擾物。(建議此過程結束后把小柱*抽干)

  洗脫----用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集。(注意流速不要過快,以1ml/min為宜)

  2)填料保留雜質

  固相萃取操作一般有三步:

  活化--除去柱子內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。(注意整個過程不要使小柱干涸)

  上樣--將樣品轉移入柱,此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出,雜質被保留在柱上,故此步驟要開始收集(注意流速不要過快)

  洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集,合并收集液。(注意流速不要過快)

  此種情況多用于食品或農殘分析中去除色素。

 

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