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分光光度法校準(zhǔn)原理

更新日期: 2015-05-13
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分光光度計法校準(zhǔn)原理是將混合有特殊物質(zhì)的液體——即溶劑(英文solution),通過移液器量取后注入目標(biāo)容器,然后通過使用特定的濾波片過濾掉一部分不需要的波長的光后,再對剩余的特定的波長的光進(jìn)行測量,從而由此計算出移液器實(shí)際吸取和排出的液體——即溶劑。由分光光度法校準(zhǔn)的原理可見,在采用分光光度法對移液器校準(zhǔn)的過程中,可能對校準(zhǔn)結(jié)果帶來影響的因素主要有:
1 溫度,因?yàn)榉止夤舛确ㄍ瑯有枰褂玫揭后w即溶劑,一定質(zhì)量量的溶劑,其容積同樣受到溫度的影響而變化。但如果在用戶所在的場所對移液器進(jìn)行校準(zhǔn),則此影響可以不計,因?yàn)槟骋粋€具體用戶所在的場所內(nèi)的溫度變化,相對來說是固定的,那么這種由溫度帶來的影響,同樣也會存在于用戶實(shí)際工作中,因此這兩者是可以相互抵消的(乾蕓儀器科技有限公司備注:目前在該領(lǐng)域較為成熟的技術(shù)來自于美國一家實(shí)驗(yàn)室);
2 氣壓,同溫度帶來的影響一樣,由氣壓帶來的影響也是可以相互抵消的;
3 操作人員的操作習(xí)慣帶來的影響,因?yàn)榉止夤舛确ㄊ强梢员恢苯釉诮K端用戶使用場所應(yīng)用的一種移液器校準(zhǔn)方法,其操作方法相對于傳統(tǒng)的衡量法(或稱重法)更為簡單、可靠,因此*可由移液器的使用者來直接對其使用的移液器采用分光光度法進(jìn)行校準(zhǔn)。這樣操作者的操作習(xí)慣在校準(zhǔn)過程中表現(xiàn)出來的差異同樣存在與今后的使用過程中,這兩者之間的差異也可以相互抵消的;
4 環(huán)境濕度,因?yàn)榉止夤舛确ú皇菍σ埔浩髋懦龅娜軇┻M(jìn)行稱量,而是對溶劑中所包含的特殊物質(zhì)的光波進(jìn)行測量,同時這種特殊物質(zhì)是不可揮發(fā)的,因此在整個測試過程中,其已經(jīng)通過移液器排出的溶劑,無論其質(zhì)量如何變化,但結(jié)果是不會受到影響的,也就是不需要對環(huán)境的干濕度進(jìn)行控制。
至此我們幾乎可以說,針對移液器采用分光光度發(fā)進(jìn)行校準(zhǔn),其整個的測試過程是幾乎不受環(huán)境因素影響的,如溫度、氣壓、干濕度等,同時因在這一校準(zhǔn)過程中,校準(zhǔn)人和終使用人可以做到是同一人,從而因人的因素而帶來的差異也是降到低的。當(dāng)然這種方法也不確定因素,比如分光光度法設(shè)備及使用的試劑自身也必然存在一定的誤差,這與傳統(tǒng)的衡量法(或稱重法)里測量儀器自身的誤差一樣,比如電子天平自身的誤差、溫度計自身的誤差、干濕度計以及氣壓計自身的誤差等,但這些來自于測量設(shè)備、溶劑自身的誤差,通常是恒定的,并且是可以事先測量、估算的,可以通過的測量數(shù)據(jù)進(jìn)行修正的方法來避免的。
當(dāng)然,目前分光光度法作為一種針對移液器校準(zhǔn)的新的應(yīng)用方法還是剛剛興起,在國外也只有少數(shù)研究機(jī)構(gòu)或?qū)嶒?yàn)室在使用,在我國目前僅停留在理論層面的評估上,并沒有在實(shí)際中推廣、應(yīng)用。但因?yàn)榉止夤舛确ú皇墉h(huán)境因素干擾,且設(shè)備攜帶方便,使得其應(yīng)用環(huán)境更為隨意、寬廣,因此根據(jù)我們乾蕓儀器科技有限公司多年的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為,這種新型的針對移液器校準(zhǔn)的方法,在不久的將來,將會得到更多用戶的肯定與承認(rèn)。 
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